Purificação, Caracterização, Determinação de Sequência e Análise Espectrométrica de Massa de um Inibidor de Tripina de Sementes da Árvore Brasileira Dipteryx Alata (Leguminosae)

O inibidor de tripsina Dipteryx alata (DATI) foi purificado e completamente sequenciado. Ele mostrou homologia para membros da família de inibidores Bowman-Birk. A última etapa da purificação de DATI por RP-HPLC (coluna C18 de borro estreito) sugeriu a existência de algumas isoformas do inibidor devido à presença de um aglomerado de picos muito próximos no cromatograma. Usando espectrometria de massa por ionização por electropulverização (ESIMS) e espectrometria de massa por dessorção a laser (LDIMS), a identificação de isoformas DATI foi possível. A partir dos dados ESIMS, foram encontradas as seguintes massas moleculares: 6803,22 +/- 0,92 para a isoforma a; 6890,94 +/- 0,73 para b; 6977,58 +/- 0,39 para c; 7065,07 +/- 0,67 para d; 7151,42 +/- 0,86 para e; e 7291,70 +/- 0,43 para f. Massas semelhantes foram encontradas ao usar LDIMS. A isoforma b foi a mais abundante e sua massa molecular correspondeu à massa molecular de 6893 calculada a partir da sequência de DATI. As diferenças de massa entre a e b, bec, c e d e e foram iguais a 87, o que corresponde a Ser. A isoforma a pode não ter o Ser do terminal N presente na isoforma b, enquanto os outros resíduos Ser adicionais podem compreender uma linha localizada no terminal C ou N. A aparência de todas essas isoformas pode resultar do processamento pós-tradução dos terminais N e C. enquanto os outros resíduos Ser adicionais podem compreender uma linha localizada no terminal C ou N. A aparência de todas essas isoformas pode resultar do processamento pós-tradução dos terminais N e C. enquanto os outros resíduos Ser adicionais podem compreender uma linha localizada no terminal C ou N. A aparência de todas essas isoformas pode resultar do processamento pós-tradução dos terminais N e C.